La gélose en boîte de Petri est la base de tout bon travail de mycologie : elle permet d’isoler, d’observer et de sélectionner un mycélium propre avant de passer aux grains ou aux substrats. Dans cet article, vous voyez l’essentiel : types de géloses, différences entre boîtes de Petri en verre et en plastique, préparation, utilisation, conservation et stérilisation dans le cadre de la culture de champignons comestibles ou médicinaux.
Qu’est-ce qu’une gélose en boîte de Petri ?
Une gélose en boîte de Petri est un milieu solide composé :
- d’un gélifiant (souvent de l’agar-agar, extrait d’algues) ;
- d’un milieu nutritif adapté (extrait de malt, pomme de terre, etc.) ;
- d’eau purifiée.
En mycologie, on utilise souvent des milieux de type MEA / GEM (gélose à l’extrait de malt) ou d’autres milieux nutritifs proches, très adaptés aux levures, moisissures et champignons filamenteux.
Ces milieux gélosés sont employés partout en microbiologie (INRAE, CNRS, etc.) pour cultiver des bactéries, champignons et levures dans un environnement standardisé et reproductible.
Boîte de Petri en verre vs plastique
Les deux options ont leurs avantages :
Boîtes de Petri en plastique (PS, à usage unique)
- Fréquemment prêtes à l’emploi, stériles, emballées sous plastique.
- Pratiques pour enchaîner les séries de cultures sans se soucier du lavage.
- Idéales pour limiter les contaminations croisées (on jette après usage).
- Disponibles aussi déjà coulées, avec gélose stérile pour culture mycélienne.
Boîtes de Petri en verre (réutilisables)
- Plus écologiques et robustes dans le temps.
- Se stérilisent en autoclave / stérilisateur ou autocuiseur adaptée, puis se réutilisent.
- Demandent plus de travail : nettoyage soigné, séchage, emballage ou fermeture adaptée avant stérilisation.
En pratique, beaucoup de cultivateurs de champignons utilisent le plastique stérile pour le confort et le verre pour les séries de tests régulières en labo maison bien équipé.
Préparer une gélose en boîte de Petri (vision simplifiée)
Pour rester dans un cadre haut niveau et sécurisé, l’idée est simplement de comprendre le déroulé général, sans rentrer dans des recettes au gramme près ni des paramètres de laboratoire avancés :
- Choisir son milieu
- Soit un mélange tout prêt de gélose nutritive à reconstituer (par exemple les sachets TerraFungi prévus pour 1 L de gélose nutritive).
- Soit un mélange “maison” (extraits nutritifs + agar) en suivant la notice du fournisseur ou de votre livre de référence.
- Dissoudre le mélange dans l’eau
- On mélange la poudre et l’eau jusqu’à obtenir un liquide homogène.
- On chauffe pour bien dissoudre l’agar (sans détailler de courbes de température).
- Stériliser le milieu liquide
- La stérilisation se fait dans un appareil adapté (autoclave, stérilisateur ou autocuiseur prévu pour ça) en suivant strictement les préconisations de sécurité du fabricant.
- Le but : éliminer spores, bactéries et moisissures, parasites du milieu.
- Couler la gélose en boîtes de Petri
- Une fois le milieu stérilisé et légèrement refroidi, on le verse dans des boîtes de Petri stériles dans un environnement le plus propre possible (salle calme, courant d’air limité, surface désinfectée).
- On laisse la gélose en boîte de Petri solidifier complètement avant de la manipuler.
- Stocker les boîtes gélosées
- Une fois solidifiées, on ferme bien les boîtes.
- On peut les filmer ou les mettre dans des sachets propres pour limiter le dessèchement et les variations d’humidité.
- Les géloses finissent toujours par se rétracter et se décoller des parois (synérèse) avec le temps : plus le stockage est long, plus le gel perd de l’eau.
Utilisation des géloses en Petri en mycologie
En culture de champignons comestibles ou médicinaux, la gélose en boîte de Petri sert principalement à :
- Cloner un champignon frais : on prélève un petit morceau de tissu interne propre (par exemple dans le pied) et on le dépose au centre de la gélose pour faire partir une souche.
- Nettoyer une souche contaminée : repérer des zones de mycélium sain en bordure d’une colonie et les transférer sur une nouvelle boîte.
- Conserver une souche de travail : certaines géloses “mère” sont conçues pour stocker un jeune mycélium, propre, qui servira de base pour vos cultures futures. TerraFungi propose par exemple des géloses mères G1 prêtes à l’emploi pour différentes espèces.
Pour limiter les erreurs :
- On manipule toujours dans un environnement propre, en réduisant au maximum les courants d’air.
- On évite de cultiver des organismes inconnus : on reste dans le cadre champignons comestibles / médicinaux, non pathogènes.
- Pour tout ce qui touche aux bactéries ou agents pathogènes, on se réfère à un labo adapté et aux réglementations en vigueur.
Conservation, durée de vie et bonnes pratiques
Une gélose en boîte de Petri est un produit vivant :
- Avec le temps, la gélose se dessèche, se rétracte et se décolle des bords de la boîte, ce qui diminue sa qualité.
- Selon le type de milieu et les conditions (filmage, température fraîche et stable, humidité), les boîtes vides ou ensemencées peuvent se conserver plus ou moins longtemps.
- Pour la culture de champignons, on reste en général sur des durées raisonnables : on ne garde pas des boîtes oubliées pendant des mois au fond du frigo.
Si vous ne souhaitez pas gérer toute la partie préparation / stérilisation, il existe des solutions prêtes :
- Boîtes de Petri gélosées stériles (à usage unique) pour culture mycélienne.
- Sachets de mélange nutritif pour gélose pour préparer rapidement un litre de milieu mycologique fiable.
Ce type de matériel simplifie la partie technique et permet de vous concentrer sur la culture de champignons elle-même
Pour acheter les mélanges tout prêt :
Mélange gélose nutritive 40 g (1 L) – prêt à l’emploi
pour aller plus loin : Préparation des milieux gélosée
